Proteasas en bazo de ratón Balb/c infectado con Yersinia pseudotuberculosis

Sierra Martínez Pavel, Aydee Citlalii Román Galindo, Brian Eulalio Cárdenas Hernández, Argelia Poblete Mayo, Donaciano Flores Robles

Resumen


Yersinia pseudotuberculosis es un patógeno bacteriano el cual secreta proteínas para manipular la maquinaria celular y evadir la respuesta inmune, inyectando proteasas en el citoplasma de la célula eucarionte. Para determinar el perfil de expresión de proteasa en el bazo, se infectaron ratones Balb/C a diferentes tiempos con Y. pseudotuberculosis, se  extrajo el órgano a diferentes horas (5, 10, 15, 20, 30, 40, 48). Posteriormente, se obtuvo el extracto total para la realización del SDS-PAGE al 10% copolimerizado con albumina al 0.4 % se incubó a 37°C  en buffer de acetato de sodio. Para detectar la actividad de gelatinasa el gel se tiñó con azul de Coomassie. El tipo de proteasa se determinó usando inhibidores de enzimas como: pepstatina, EDTA, 1-10 fenantrolina+EDTA, N- etilmaleimida, entre otras. Por lo que se logró determinar que en el bazo de ratón infectado por Y. pseudotuberculosis se expresan proteasas las cuales presentan  PM de 150, 200 y 250.

Texto completo:

PDF / RESUMEN PDF / WORD

Referencias


Bi, Y., Wang, X., Han, Y., Guo, Z., Yang, R. (2012). Yersinia pestis versus Yersinia pseudotuberculosis effects on host macrophages. Scand J Immunol. 76 (6): 541-551.

Bottone, E. J. (1997). Yersinia enterocolitica: the charisma continues. Clinic Microbiol Rev. 10(2): 257- 276.

Autenrieth, I. B., Kempf, V., Sprinz, T., Preger, S., Schnell, A. (1996). Defense mechanisms in Peyer`s patches and mesenteric lymph nodes against Yersinia enterocolitica involve integrins and cytokines. Infect Immun. 64(4): 1357-1368.

Wuorela, M., Tohka, S., Granfors, K., Jalkanen, S. (1999). Monocytes that have ingested Yersinia enterocolitica serotype 0:3 acquire enhanced capacity to bind to non stimulated vascular endotelial cells via P-selectin. Infect Immun. 67(2): 726-732.

Rocha-Gracia, R. C., Martínez-Laguna, Y., Lozano-Zaraín, (2004) Mecanismos de Patogenicidad e interacción Parásito Hospedero. Primera edición, BUAP. Puebla, México. 325pp

Leung, K.Y., Reisner, B. S. Straley, S. C. (1990). Yop inhibits platelet aggregation and is necessary for virulence of Yersinia pestis in mice. Infectimmun. 58(10): 3262-327

Thinwa J., Segovia, J. A., Bose, S., Dube, P. H. (2014). Integrin-Mediated First Signal for Inflammasome Activation in Intestinal Epithelial Cells. J. Immuno. 193(3): 1373-1382.

Fábrega A; vila J. (2012) Yersinia enterocolitica: Pathogenesis, virulence and antimicrobial resistence, Enfer infecc y microbiol clin.1:24-32

La Rock, C. N., Cookson, B.T. (2012) TheYersinia Virulence Effector Yop M Binds Caspase-1 to Arrest Inflammasome Assembly and Processing. Cell Host & Microbe. 12(6): 799-805

Aepfelbacher, M. (2004). Modulation of Rho GTPases by type III secretion system translocated effectors of Yersinia. Ergebnisse Physiol. Biol. Chem. Exp. Pharmakol 152: 65-77

Navarro, L., Koller, A., Nordfelth, R., Wolf-Watz, H., Taylor, S., Dixon, J. E. (2007). Identification of a molecular target for the Yersinia protein kinase. Mol. Cell 26(4): 465-477

Prehna, Gerd., Ivanov, M. I., Bliska, J. B., Stebbins, S. T. (2006). Yersinia virulence depends on mimicry of host Rho-family nucleotide dissociation inhibitors. Cell. 126(5): 869-880.

Aepfelbacher, M., Trasak, C., Wilharm, G., Wiedemann, A., Trülzsch, K., Krauss, K., Gierschik, P., Heesemann, J. (2003). Characterization of Yop T Effects on Rho GTPases in Yersinia enterocolitica-infected Cells. J of Bioll Chem. 278(35): 33217-33223

Trosky, J. E., Liverman, A. D. B.,Orth, K. (2008). Yersinia outer proteins: Yops. Cell Microbiol. 10 (3): 557-565.

Garibay-Cerdenares, O. L. “Niveles de fosforilación en tirosina en eritrocitos de ratón BALB/c durante un proceso infeccioso provocado por Yersinia pseudotuberculosis” (Tesis Maestría). Universidad Autónoma De Guerrero; 2008.

Torres-Ramos, A. “Análisis de la asociación de las proteínas espectrina, banda 4.1 y actina en eritrocitos de ratón BALB/c infectados con Yersinia pseudotuberculosis” (Tesis de Maestría). Universidad Autónoma de Guerrero; 2011.

Owen, C. A., Campbell, E. J. (1999) The cell biology of leukocyte-mediated proteolysis. JLeukoc Biol. 65 (2): 137-150

Owen, C. A. (2008). Leukocyte Cell Surface Proteinases: Regulation of expression, Functions, and Mechanisms of Surface Localization. J. Biochem Cell Biol. 40 (6-7): 1246-1272.

Chang, C., Werb, Z. (2001). The many faces of metalloproteases: cell growth, invasión, angiogénesis and metástasis. J TCell Biol. 11 (11): S37-S43

Jeninga, E. H., Bugge, A., Nielsen, R., Kersten, S., Hamers, N., Dani, C., Wabitsch, M., Berger, R., Stunnenberg, H. G., Mandrup, S., Kalkhoven, E. (2009). Peroxisome Proliferator-activated Receptor γ Regulates Expression of the Anti-lipolytic G-protein-coupled Receptor 81 (GPR81/Gpr81). J Biol Chem. 284 (39): 26385-26393


Enlaces refback

  • No hay ningún enlace refback.